苹果S-SAP分子标记体系建立及应用

被引：2

作者：

赵桂玲 ^{[1
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张志宏 ^{[2
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马跃 ^{[2
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常琳琳 ^{[2
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王昆 ^{[3
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代红艳 ^{[2
]}

机构：

[1] 沈阳农业大学林学院/辽宁省教育厅果树生物技术与遗传改良创新团队

[2] 沈阳农业大学园艺学院/辽宁省教育厅果树生物技术与遗传改良创新团队

[3] 中国农业科学院果树研究所

来源：

中国农业科学 | 2010年 / 43卷 / 07期

关键词：

苹果; S-SAP; 元帅芽变;

D O I：

暂无

中图分类号：

S661.1 [苹果];

学科分类号：

090201 ;

摘要：

【目的】建立和优化苹果S-SAP分子标记体系,探讨应用S-SAP技术区分元帅芽变的可能性,为从DNA分子水平上对苹果芽变鉴定和利用奠定基础。【方法】利用富士、寒富和嘎啦初步建立S-SAP分析体系;根据谱带量和多态性等对32对引物组合进行筛选;从DNA酶切、PCR扩增、银染方法等角度对影响S-SAP反应的因子进行优化;利用6对多态性引物,对8个元帅芽变进行S-SAP分析,采用NTsys-pc2软件的SIMQUAL程序计算相似系数,UPGAM方法进行循环同化阶层聚类分析,并通过Treeplot程序生成聚类图。【结果】优化的苹果S-SAP分析体系为,改良CTAB法提取基因组总DNA;MseⅠ和PstⅠ双酶切基因组总DNA;Fermentas公司的TaqDNA聚合酶进行PCR扩增;6%变性聚丙烯酰胺凝胶分离选择性扩增产物;改良弱碱法银染检测差异片段。筛选出6个适宜苹果品种分析的S-SAP引物。发现LTRP1/Mtcc引物组合在元帅芽变分析中具有多态性,矮红、红星与新元帅等具有多态性位点,供试芽变资源的遗传相似系数在0.88—0.98之间,以相似系数0.93为标准,8个元帅芽变资源可分为4类。【结论】建立了基于Ty1-copia组反转录转座子的苹果S-SAP标记体系,筛选出了6个适宜苹果品种分析的S-SAP引物,利用LTRP1/Mtcc引物组合成功区分了元帅芽变。

引用

页码：1516 / 1523

页数：8

共 16 条

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