小麦农杆菌介导转基因植株的稳定获得和检测

被引：62

作者：

叶兴国

Shirley Sato

徐惠君

杜丽璞

Tom Clemente

不详

机构：

[1] 中国农业科学院作物育种栽培研究所

[2] 美国内布拉斯加大学生物技术中心

[3] 美国内布拉斯加大学生物技术中心农业部作物遗传育种重点实验室

[4] 北京

[5] NE

[6] Lincoln

[7] USA

[8] 农业部作物遗传育种重点实验室

来源：

中国农业科学 | 2001年 / 05期

关键词：

小麦; 农杆菌; 转基因植株; 单拷贝整合;

D O I：

暂无

中图分类号：

S512.103.53 [];

学科分类号：

0901 ;

摘要：

以预培养 4 d的小麦幼胚愈伤组织为受体 ,L B培养基上激活培养 3 d或 AB培养基上激活培养 4 d,并在WCC培养基中重悬的 C5 8c1农杆菌菌系为供体 ,将含有目的基因、标记基因的 p PTN2 4 9、p PTN 2 5 4、p PTN2 70、p SIS-GFP等重组 DNA质粒转入了小麦 ,经在含 10～ 5 0 mg/ L geneticin( G4 18)、5 0 mg/ L cefotaxime、5 0 m g/ L vancomycin、5 0 m g/ L ticillicin选择培养基上多次选择 ,移栽前利用 npt EL ISA检测 ,移栽后利用叶片离体退绿、PCR和 South-ern blot 4种方法综合检测 ,共获得了 2 9株转基因植株 ,转化频率平均为 0 .82 %。在所获得的转基因植株中 ,单拷贝整合植株占 65 .5 2 %。研究结果还表明 ,不同基因型的转化效率显著不同 ,除了 Bobwhite外 ,笔者也从扬麦 10号获得了转基因植株 ;EL ISA测定值的高低与外源 DNA整合的拷贝数有一定关系 ;初步建立了农杆菌介导稳定转化小麦的技术体系。

引用

页码：469 / 474+581 +581-582

页数：8

共 3 条

[1]

Accelerated production of transgenic wheat （ Triticum aestivum L.） plants[J] . Plant Cell Reports . 1996 (1)

[2] Hygromycin resistance as an efficient selectable marker for wheat stable transformation [J].

Ortiz, JPA ;

Reggiardo, MI ;

Ravizzini, RA ;

Altabe, SG ;

Cervigni, GDL ;

Spitteler, MA ;

Morata, MM ;

Elias, FE ;

Vallejos, RH .

PLANT CELL REPORTS, 1996, 15 (12) :877-881

[3]

Glyphosate-tolerant CP4 and GOX genes as a selectable marker in wheat transformation[J] . H. Zhou,J. W. Arrowsmith,M. E. Fromm,C. M. Hironaka,M. L. Taylor,D. Rodriguez,M. E. Pajeau,S. M. Brown,C. G. Santino,J. E. Fry.Plant Cell Reports . 1995 (3)

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