高效液相色谱法快速测定血清中的芳香族氨基酸

采用高效液相色谱 紫外检测法分离测定了血清中的芳香族氨基酸。采用的色谱柱为WatersNova PakC18柱(4μm,150mm×3 9mmi d ),流动相为乙腈 水(体积比为6∶94,pH3 4)溶液,流速为1 0mL/min,检测波长为215nm。血清标本经5%(体积分数)高氯酸溶液去除蛋白质后取上清液直接进样,10min内完成测定。探讨了流动相的pH及其有机相的比例、蛋白质沉淀剂以及检测波长等因素对分离度和灵敏度的影响。考察了其他10余种氨基酸、多巴胺类等物质对目标组分检测的干扰。该方法的日内、日间测定的相对标准偏差均小于5%,芳香族氨基酸测定的线性范围、检测限、回收率等均满足临床检验的要求。结果表明:该方法简便、快速、准确、可靠,适用于临床和科研工作。