禽肉产品中禽流感与新城疫病毒多重RT-PCR检测方法的建立

被引：4

作者：

单松华 ^{[1
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汪敏 ^{[2
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金维荣 ^{[2
]}

刘俊平 ^{[1
]}

秦红友 ^{[2
]}

陶琦 ^{[1
]}

吴徐华 ^{[1
]}

机构：

[1] 上海出入境检验检疫局

[2] 上海华冠生物芯片有限公司

来源：

上海交通大学学报(农业科学版) | 2006年 / 06期

关键词：

禽流感(AIV); 新城疫病毒(NDV); 多重RT-PCR; 禽产品; 检测;

D O I：

暂无

中图分类号：

S854.43 [];

学科分类号：

摘要：

根据禽流感病毒NP基因和新城疫病毒F基因各设计1对引物,经优化单项RT-PCR(sRT-PCR)反应体系,建立的多重RT-PCR(mRT-PCR)同时检测禽流感、新城疫的极限分别为10-2.5 EID50/0.1 mL和10-3.75 EID50/0.1 mL,mRT-PCR检测禽流感的敏感性与sRT-PCR一致,mRT-PCR检测新城疫的敏感性较sRT-PCR敏感性下降2个数量级。特异性试验表明,mRT-PCR仅检测到不同亚型(H1、H3、H5、H6和H9)禽流感、不同毒力新城疫病毒,对其他9种禽病原体和SPF鸡尿囊液均未扩增出片断。mRT-PCR检测39株禽流感H1、H5和H9亚型病毒、41株不同宿主源新城疫病毒,结果与sRT-PCR、HI试验完全一致;mRT-PCR和病原分离法同时检测人工感染鸡的组织脏器,2种方法检测禽流感的符合率为93.8%(30/32),检测新城疫的符合率为95.2%(20/21);采用mRT-PCR和病原分离法同时对35份进口禽产品、32份鸡粪拭子检测,2种方法检测禽流感的符合率为100%(67/67),对新城疫的符合率为97.1%(65/67)。病原分离法的检出率虽高于mRT-PCR,经统计学分析,两者差异不显著。

引用

页码：507 / 512

页数：6

共 5 条

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