柱前衍生化反相高效液相色谱法测定板蓝根中的氨基酸

建立了板蓝根中指标性成分精氨酸、脯氨酸和谷氨酸的柱前衍生化反相高效液相色谱分析方法。以2,4-二硝基氟苯为衍生化试剂,将氨基酸在碱性条件下衍生化,然后直接进样进行高效液相色谱测定。采用的色谱条件为:色谱柱SinochromODS-BP柱(250mm×4·6mmi.d.,5μm),流动相醋酸钠缓冲溶液(pH6·4)-乙腈(体积比为850∶150),检测波长360nm,采用外标法定量。该文同时对谷氨酸、精氨酸和脯氨酸进行定性,并对精氨酸和脯氨酸进行定量。精氨酸和脯氨酸的进样量分别为0·627～5·016μg和0·874～7·000μg时,其峰面积与进样量呈良好的线性关系(r分别为0·9996和0·9995)。精氨酸和脯氨酸的平均回收率分别为98·5%(相对标准偏差(RSD)为2·5%(n=8))和98·4%(RSD为2·3%(n=8))。对板蓝根样品进行了测定,结果表明,板蓝根中精氨酸的含量最高,脯氨酸次之,谷氨酸含量很少。该法简便、准确、可靠,适用于板蓝根药材的质量控制。