棉花细菌人工染色体的荧光原位杂交(BAC-FISH)技术

被引:4
作者
王凯
张燕洁
关兵
郭旺珍
张天真
机构
[1] 南京农业大学作物遗传与种质创新国家重点实验室
关键词
棉花; 细菌人工染色体; 荧光原位杂交;
D O I
暂无
中图分类号
Q943.2 [植物基因工程]; S562 [棉];
学科分类号
071007 ; 090102 ; 0901 ;
摘要
细菌人工染色体荧光原位杂交(BAC-FISH)技术是植物染色体识别、物理作图等分子细胞遗传学研究的重要工具,但对于某些物种尤其是多倍体植物,由于大量重复序列的存在等问题,使得该技术应用受到很大的限制.通过选择棉花分子遗传图中高重组区的微卫星位点(simple sequence repeats,SSR)标记的策略,筛选到不含或含有少量重复序列的细菌人工染色体(BAC)克隆,同时,在通用FISH技术程序基础上,通过改进发根、变性、洗脱条件等步骤,构建出适合于棉花的BAC-FISH技术,简化了操作流程的同时,获得稳定的杂交结果及较高的检出率;并通过将一随机获得的BAC进行染色体的物理定位,进一步引入双探针、双色及重复杂交技术,显示了该技术的成熟与良好的应用前景和价值.
引用
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页码:1216 / 1222
页数:7
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