猪瘟RT-PCR ELISA诊断方法的建立

被引：13

作者：

杨利峰 ^{[1
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杨建民 ^{[1
]}

周向梅 ^{[1
]}

彭红 ^{[2
]}

赵德明 ^{[1
]}

机构：

[1] 中国农业大学动物医学院

[2] 北京市兽医卫生监督检验所

来源：

中国兽医学报 | 2007年 / 03期

关键词：

猪瘟病毒; RT-PCR ELISA; 诊断;

D O I：

10.16303/j.cnki.1005-4545.2007.03.002

中图分类号：

S854.43 [];

学科分类号：

摘要：

将RT-PCR方法和高灵敏度的地高辛检测系统相结合,先建立猪瘟病毒(classical swine fever virus,CSFV)的RT-PCR方法,用地高辛标记RT-PCR产物;再建立CSFV的PCR-ELISA方法,用生物素标记的探针在链亲和素包被的微量板孔中杂交捕获地高辛标记的PCR产物,最后进行免疫显色得出结果。试验主要对RT-PCR ELISA的各种反应条件进行了优化,确定了1mg/L的链亲和素、50μg/L生物素标记的探针、1∶3000抗地高辛的过氧化物酶、37℃杂交2h等为最适反应条件。该方法的敏感性比常规琼脂糖凝胶电泳检测高100倍以上,克服了组织样品中CSFV含量少而难以检测的困难,为猪瘟的早期诊断和分子流行病学调查提供了一条新途径。

引用

页码：292 / 295

页数：4

共 6 条

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