种传番茄溃疡病菌直接PCR和免疫捕捉PCR检测方法之比较附视频

被引:8
作者
闵现华 [1 ,2 ]
韩跃武 [1 ]
刘箐 [2 ,3 ]
王军平 [2 ]
刘雅莉 [4 ]
文朝慧 [2 ]
刘姝彤 [2 ]
宋蕤 [2 ]
施颖波 [2 ]
机构
[1] 兰州大学基础医学院医学生物化学与分子生物学研究所
[2] 甘肃出入境检验检疫局
[3] 兰州大学生命科学院细胞生物学研究所
[4] 甘肃农业大学食品科学与工程学院
关键词
番茄溃疡病; 番茄种子; 直接PCR; 免疫捕捉PCR;
D O I
10.19662/j.cnki.issn1005-2755.2010.04.003
中图分类号
S436.412 [番茄病虫害];
学科分类号
摘要
用PBS和种子研磨后的普通病原提取液稀释番茄溃疡病菌纯菌液,并以梯度纯菌液和带菌种子提取液作为模板进行直接PCR和免疫捕捉PCR,比较2种方法在纯菌液和带菌种子提取液中的检测灵敏度,找到一种高特异性、高灵敏度、简便快捷的方法用于检测番茄种子携带的番茄溃疡病菌。结果显示在纯菌液中直接PCR灵敏度为104cfu/mL,免疫捕捉PCR为102cfu/mL;在带菌种子提取液中直接PCR灵敏度为106cfu/mL,免疫捕捉PCR为104cfu/mL;免疫捕捉PCR比直接PCR灵敏度高100倍,尤其在实际种子检测中优势更明显,而且检出时间短,重复性好。
引用
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