鹅源腺病毒全基因组DNA酶切片段的克隆

被引:5
作者
徐福洲
崔治中
段玉友
刘岳龙
孙怀昌
何良梅
机构
[1] 北京市农林科学院畜牧兽医研究所
[2] 扬州大学畜牧兽医学院动物医学系!江苏扬州
[3] 扬州大学畜牧兽医学院动物医学系!江苏
关键词
鹅源腺病毒; 基因组; 酶切片段; 克隆;
D O I
10.19411/j.1007-824x.2001.01.010
中图分类号
S855 [兽医传染病学];
学科分类号
0906 ;
摘要
利用 1株鹅源腺病毒 Y81G4 株 ,经鹅胚增殖后收获尿囊液 ,用差速离心法纯化病毒子并提取病毒基因组 DNA.病毒 DNA经 H ind 酶切后共产生 1 0个片段 ,分别回收各酶切片段 ,与经 H ind 单酶切的p UC1 8连接 ,获得 8个不同的重组质粒 .对于未克隆到的两末端片段 ,经碱处理去除末端蛋白后 ,以平端和 H ind 粘端与经 Sma 和 H ind 双酶切的 p UC1 8连接 ,获得了重组质粒 p GAHC和 p GAHI.克隆的各酶切片段 ,通过酶切电泳和 Southern blotting结果鉴定 ,证明已分别克隆到该病毒基因组 DNA H ind 酶切片段 ,且各酶切片段大小之和约为 3 2 .9kb
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