石鲽鱼鱼苗中一种弹状病毒的分离与鉴定

被引:13
作者
孙颖杰 [1 ,2 ]
江育林 [3 ]
刘荭 [3 ]
高隆英 [3 ]
史秀杰 [3 ]
何俊强 [3 ]
王哲 [1 ]
机构
[1] 吉林大学畜牧兽医学院
[2] 辽宁出入境检验检疫局
[3] 深圳出入境检验检疫局
关键词
石鲽鱼; 牙鲆弹状病毒; 分离; 鉴定;
D O I
暂无
中图分类号
S943 [各种鱼的病害、敌害及其防治];
学科分类号
090303 [农业农村环境保护与治理(农业环境保护)];
摘要
从养殖石鲽鱼(Kareius bicoloratus)鱼苗中分离到1株弹状病毒(080113株)。用研磨离心除菌后的组织匀浆液,接种11种鱼类细胞系。结果在鲤上皮瘤细胞(EPC)和肥头鲤细胞系(FHM)等8种细胞中均出现明显的细胞病变(Cytopathic effect,CPE),在鲤上皮瘤细胞(EPC)中的滴度最高。对该毒株的理化性质进行了测定,结果显示080113株对温度和pH敏感;对5′-碘-2′脱氧尿密啶(I UDR)不敏感;对氯仿敏感,提示是一种有囊膜的RNA病毒。制备电镜超薄切片,观察到在细胞质中有大小为(80~118)nm×(28~55)nm、形态为典型的弹状的病毒粒子。SDS-PAGE电泳分析该毒株的蛋白质图谱,结果表明该毒株有5条主要的蛋白带,相对分子质量大小分别为200 000、56 000、42 000、29 000和24 000。用传染性造血器官坏死病毒(I HNV)、病毒性出血性败血症病毒(VHSV)和牙鲆弹状病毒(HRV)等水生动物弹状病毒特异性引物对该毒株进行逆转录聚合酶链式反应,结果用HRV的引物能扩增出阳性片段。对该片段进行测序分析,发现与HRV的参考序列有99%以上的相似性。因此,初步鉴定该毒株为牙鲆弹状病毒。
引用
收藏
页码:277 / 282
页数:6
相关论文
共 8 条
[1]
牙鲆一株弹状病毒病原的分离与鉴定 [J].
桂朗 ;
李正秋 ;
张奇亚 .
水生生物学报, 2007, (03) :345-353
[2]
鱼病毒性神经坏死病病毒(VNNV)不同基因型鉴别方法的建立及在VNN检疫和监测中的应用 [J].
刘荭 ;
史秀杰 ;
高隆英 ;
何俊强 ;
江育林 ;
陈焕春 .
水产学报, 2004, (06) :695-702
[3]
草鱼出血病病原的研究 [J].
陈燕燊 .
水生生物学集刊, 1978, (03) :321-330
[4]
A survey of expressed genes in the leukocytes of Japanese flounder; Paralichthys olivaceus ; infected with Hirame rhabdovirus.[J].Bo-Hye Nam;Eiichi Yamamoto;Ikuo Hirono;Takashi Aoki.Developmental and Comparative Immunology.2000, 1
[5]
Sequences of 596 cDNA clones (565,977 bp) of Japanese flounder (Paralichthys olivaceus) leukocytes infected with hirame rhabdovirus [J].
Aoki, T ;
Nam, BH ;
Hirono, I ;
Yamamoto, E .
MARINE BIOTECHNOLOGY, 1999, 1 (05) :477-488
[6]
The glycoprotein genes and gene junctions of the fish rhabdoviruses spring viremia of carp virus and hirame rhabdovirus: analysis of relationships with other rhabdoviruses.[J]..Virus Research.1996, 1
[7]
Fish cell lines: Establishment and characterization of nine cell lines from salmonids.[J].C. N. Lannan;J. R. Winton;J. L. Fryer.In Vitro.1984, 9
[8]
Fish cell culture: A fibroblastic line (PG) from ovaries of juvenile pike ( Esox lucius ).[J].W. Ahne.In Vitro.1979, 11