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第一内含子对人胰岛素基因在BHK细胞中表达的影响
被引：8
作者：
李华
王吉贵
刘维全
王苹
董婉维
齐顺章
机构：
[1] 中国医科大学实验动物部
[2] 中国农业大学生物学院
[3] 解放军军需大学军事兽医研究所
[4] 吉林大学耳鼻喉研究所
[5] 中国农业大学生物学院 沈阳
[6] 北京
[7] 吉林长春
[8] 沈阳
来源：
关键词：
内含子;
胰岛素,基因;
细胞系;
基因表达;
D O I：
暂无
中图分类号：
Q756 [遗传的调节控制（遗传代谢的调节控制）];
学科分类号：
071007 ;
摘要：
目的 构建人胰胰岛素基因真核表达载体 ,为胰岛素基因研究奠定基础。方法 从人基因组文库中扩增胰岛素基因的第一内含子 ,经测序证实其序列完全正确后 ,与pCMV mINS中的mINS基因融合 ,构建成带有第一内含子的胰岛素基因组基因真核表达质粒pCMV ImINS。分别用pCMV mINS和pCMV ImINS转染BHK细胞 ,经G4 18筛选 ,将阳性克隆传至 2 0代后 ,用放免方法和免疫组化法分析胰胰岛素和 或胰岛素原在BHK细胞中的表达量情况。结果 经放免测定 ,pCMV mINS和pCMV ImINS在BHK细胞中胰岛素和 或胰岛素原的表达量分别为4 0 77μIU ml和 5 0 6 8μIU ml。经免疫组化分析 ,pCMV mINS在BHK细胞质中胰岛素表达水平的灰度值为 190 0±19 5 6 ;pCMV ImINS在BHK细胞质中胰岛素表达水平的灰度值为 186 4± 10 2 4。结论 在BHK细胞中胰岛素基因的第一内含子对胰岛素的表达起正调控作用
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