Clostridium bolteae ATCC BAA-613 D-塔格糖3-差向异构酶的诱导表达、纯化及活性研究

被引：2

作者：

储菲菲 ^{[1
]}

沐万孟 ^{[1
]}

邢庆超 ^{[1
]}

周榴明 ^{[2
]}

张涛 ^{[1
]}

江波 ^{[1
]}

机构：

[1] 江南大学食品科学与技术国家重点实验室

[2] 罗盖特美国公司

来源：

食品工业科技 | 2012年 / 33卷 / 07期

关键词：

D-塔格糖3-差向异构酶; D-阿洛酮糖; 基因重组; 亲和层析;

D O I：

10.13386/j.issn1002-0306.2012.07.007

中图分类号：

Q786 [基因的表达];

学科分类号：

071007 ; 0836 ; 090102 ;

摘要：

D-塔格糖3-差向异构酶是生物法生产新型功能性因子D-阿洛酮糖最为有效的酶。一种新型的能够编码D-塔格糖3-差向异构酶的基因CLOBOL00069被克隆,它来源于Clostridium bolteae ATCC BAA-613。以pUC57为克隆载体,以pET-22b（+）为载体质粒,E.coli BL21（DE3）为宿主细胞,构建了基因重组工程菌。IPTG诱导剂诱导目的蛋白的表达;通过镍柱亲和层析,杂蛋白与目的蛋白得到了很好的分离。对纯化的重组蛋白样品进行SDS-PAGE分析,在约32ku处出现明显的特征条带。通过活性研究表明,Clostridium bolteae ATCC BAA-613 DTEase属于DTEase家族,并具有较高的生物转化率,反应10h后转化率达到20%。

引用

页码：198 / 201+392 +392

页数：5

共 9 条

[1]

蛋白质技术手册.[M].汪家政;范明主编;.科学出版社.2000,

[2] Characterization of d-tagatose-3-epimerase from Rhodobacter sphaeroides that converts d-fructose into d-psicose [J].

Zhang, Longtao ;

Mu, Wanmeng ;

Jiang, Bo ;

Zhang, Tao .

BIOTECHNOLOGY LETTERS, 2009, 31 (06) :857-862

[3]

Characterization of d -tagatose 3-epimerase from Rhodobacter sphaeroides SK011.[J].Longtao Zhang;Bo Jiang;Wanmeng Mu;Tao Zhang.Journal of Biotechnology.2008, S

[4] Crystal structures of D-tagatose 3-epimerase from Pseudomonas cichorii and its complexes with D-tagatose and D-fructose [J].