极端嗜热厌氧纤维素分解菌基因文库的构建及其内切葡聚糖酶基因片段的克隆

被引：9

作者：

洪芳

田宇

徐恒

邓宇

胡国全

张辉

机构：

[1] 四川大学生命科学学院

[2] 农业部沼气科学研究所

[3] 农业部沼气科学研究所成都

[4] 成都

来源：

四川大学学报(自然科学版) | 2003年 / 06期

关键词：

嗜热厌氧; 纤维素分解菌; 基因文库; ED基因; 克隆;

D O I：

暂无

中图分类号：

Q933 [微生物遗传学];

学科分类号：

071007 ;

摘要：

以从云南邦拿掌温泉中分离、纯化的高温厌氧纤维素分解菌邦2菌(Cadicellulosiruptor)为材料,制备其总DNA,经限制性核酸内切酶EcoRⅠ部分酶切后,在T4DNA连接酶的作用下与经EcoRⅠ完全酶切、去磷酸化的质粒载体pUC18连接,然后转化E.coliJM109,建立了邦2的基因文库,经筛选鉴定得到6.3×103个重组子;重组子经刚果红平板验证:约有23.5%菌落呈现透明圈;重组子经EcoRⅠ酶切验证显示:重组质粒均含有外源DNA插入片段.结果表明已克隆到邦2菌纤维素酶系中的内切葡聚糖酶基因(ED基因)片段.

引用

页码：1179 / 1182

页数：4

共 9 条

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张辉 ;

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四川大学学报(自然科学版), 2002, (01) :167-169

[4] 纤维素酶基因克隆及应用前景 [J].

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[5] 生孢噬纤维粘菌基因文库的构建和纤维素酶基因的克隆 [J].

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张立新，刘纯强，蒯军，高培基 .

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