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- [2] 转录调控基因GmLEC1的cDNA克隆及其植物表达载体的构建[J]. 华北农学报, 2009, 24 (01) : 64 - 68朱红林沙爱华符秀梅李小靖陈银华单志慧邱德珍周新安
- [10] 分子克隆实验指南.[M].(美)J.萨姆布鲁克(JosephSambrook);(美)D.W.拉塞尔(DavidW.Russell)著;黄培堂等译;.科学出版社.2002,
转基因大豆插入位点分析及特异性PCR检测方法的建立
被引：4
作者：
郭娜娜
[1
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吴辉
[1
]
于晓惠
[2
]
黄惜
[1
]
陈银华
[1
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彭明
[2
]
机构：
[1] 海南大学农学院
[2] 中国热带农业科学院热带生物技术研究所
来源：
关键词：
转基因大豆;
LEC1基因;
事件特异性检测;
TAIL-PCR;
D O I：
暂无
中图分类号：
S565.1 [大豆];
学科分类号：
摘要：
采用TAIL-PCR方法研究转基因大豆外源基因LEC1插入位点序列特征,并根据此特征建立了LEC1转化事件特异性检测方法。依据正义表达载体上T-DNA区段侧翼序列设计特异性引物和简并引物,获得4个同源序列。对获得的序列进行Blastn分析发现,p69、p148、p225均为载体T-DNA区段一部分,未见大豆基因组序列;P217插入片段的序列分析表明,该序列长863 bp,其中T-DNA左边界序列长143 bp,720 bp为大豆基因组片段,与大豆光系统II类囊体膜蛋白(Thylakoid membrane proteins)的206-926区段同源性为99%,这表明,外源DNA插入了大豆基因组中类囊体膜蛋白编码区的206位。根据分离的序列建立事件特异性定性检测方法,扩增片段大小为277 bp。该事件特异性检测方法具有高度的特异性和良好的灵敏性,为转基因大豆品种LEC1的身份识别提供了有效的方法。
引用
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页数：5
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