Real-time PCR测定食品中蜡样芽胞杆菌的数量

目的:采用Real-time PCR的定量方法对食品中所含蜡样芽胞杆菌的数量进行快速的检测。为食物中毒的快速检测提供有力依据。方法:采用蜡样芽胞杆菌的肠毒素基因(Genebank D17312)作为靶基因,建立PCR反应体系。用已定量的蜡样芽胞杆菌DNA提取液作为外部参照,建立标准曲线进行定量检测。准备模拟样品,把PCR定量方法和国家标准方法的结果进行比较。结果:该反应体系的灵敏度和特异性均能够达到要求。对国标法和PCR定量方法的结果采用T检验分析,t=0.38,v=33,P>0.05,其结果无显著性差异。结论:本实验所采用的Real-time PCR定量方法检测食品中的蜡样芽胞杆菌数量,比国标法操作简单,所需时间短,并有较好的灵敏度和特异性,可以运用到日常工作中。