柑橘黄龙病、裂皮病和衰退病病原的多重RT-PCR检测

被引:16
作者
丁芳 [1 ]
曹庆 [2 ]
王国平 [1 ]
易干军 [2 ]
钟云 [2 ]
机构
[1] 华中农业大学植物科学技术学院
[2] 广东省农业科学院果树研究所
关键词
柑橘; 多重RT-PCR; 黄龙病; 裂皮病; 衰退病; 检测;
D O I
10.16420/j.issn.0513-353x.2006.05.003
中图分类号
S436.66 [柑桔类病虫害];
学科分类号
090401 ; 090402 ;
摘要
建立了一种同时检测柑橘黄龙病病原类细菌(CandidatusLiberibacterasiaticus,HLB)、柑橘裂皮类病毒(Citrusexocortisviroid,CEVd)、柑橘衰退病病毒(Citrustristezavirus,CTV)的多重RT-PCR技术体系。运用根据3种病原核苷酸保守区序列设计的特异性引物,成功的对同一样品中的HLB、CEVd、CTV进行多重RT-PCR扩增,得到1160bp、371bp、273bp3条特异性大小与试验设计相符的条带。就影响多重PCR的主要因素引物浓度和退火温度进行了一系列优化,建立了能同时检测HLB、CEVd、CTV的多重RT-PCR技术体系。该体系最低能从10pg总RNA中检测出黄龙病类细菌和柑橘裂皮类病毒,从1pg总RNA中检测到柑橘衰退病毒。对采自田间37份材料的实际检测表明:存在两种或3种病原的复合侵染。
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