腺病毒介导转染人生长转化因子β1的脂肪干细胞复合多孔β-磷酸三钙支架体外培养的研究

被引：4

作者：

方忠

杨琴

熊伟

李光辉

肖骏

李锋

机构：

[1] 华中科技大学同济医学院附属同济医院骨科

来源：

中华实验外科杂志 | 2011年 / 07期

关键词：

脂肪干细胞; β-磷酸三钙; 支架; 组织工程;

D O I：

暂无

中图分类号：

R3 [基础医学];

学科分类号：

1001 ;

摘要：

目的观察腺病毒介导转染人生长转化因子β1(Ad-hTGF-β1)的脂肪干细胞(ADSCs)与多孔β-磷酸三钙(β-TCP)支架材料在体外复合培养,探讨它们之间的相容性以及其构建组织工程软骨的可行性。方法含增加型绿色荧光蛋白(EGFP)基因的腺病毒表达载体pAd-hTGF-β1,经包装、转染兔脂肪干细胞,筛选出成功转染Ad-hTGF-β1的ADSCs,然后将携Ad-hTGF-β1的ADSCs(密度1×10～6个/ml)与多孔β-磷酸三钙支架中行三维立体复合培养,定期扫描电镜观察细胞黏附能力、增殖活力以及形态学改变,并通过逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)、Western blot法和免疫组织化学法检测软骨特异性细胞外基质蛋白Ⅱ型胶原蛋白(CollagenⅡ)的表达。结果多孔β-TCP支架孔径在300～450μm之间,孔隙率65%;扫描电镜显示Ad-hTGF-β1的ADSCs与β-TCP支架材料在体外培养期间支架无塌陷及形变,且在支架上黏附、增殖良好,并能分泌软骨细胞外基质collagenⅡ,其分泌随时间呈增加的趋势。结论多孔β-TCP支架具有适宜的微孔结构、良好的生物相容性和软骨诱导作用,可以作为软骨组织工程较理想的支架材料。且其与转染Ad-hTGF-β1的ADSCs相结合有望构建组织工程软骨。

引用

共 8 条

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