抗黄曲霉毒素M1单克隆抗体的制备及定量ELISA方法的建立

被引:3
作者
张园园 [1 ]
裴世春 [1 ]
才琳 [1 ]
何娜 [1 ]
赵识非 [1 ]
霍贵成 [2 ]
机构
[1] 黑龙江八一农垦大学食品学院
[2] 东北农业大学
关键词
黄曲霉毒素M1; 酶联免疫吸附测定; 单克隆抗体;
D O I
暂无
中图分类号
R446.61 [免疫学检验方法];
学科分类号
100208 ;
摘要
采用黄曲霉毒素M1与牛血清白蛋白偶联物免疫8周龄BALB/c小鼠,4次免疫后,使小鼠产生免疫应答,取其脾细胞与Sp2/0骨髓瘤细胞融合、筛选,最终获得1株能稳定分泌抗黄曲霉毒素M1的杂交瘤细胞株系。其染色体平均计数为90±10对,间接ELISA检测该株系培养上清的效价为1∶6400,纯化腹水效价为5000×27,与黄曲霉毒素M1及其结构类似物黄曲霉毒素B1和脱氧雪腐镰刀菌烯醇的反应率分别为100%、7%、0%。经传30代后,抗体效价稳定。并在此基础上建立了间接竞争ELISA检测方法,该方法的最低检出浓度是0.08ng/mL,校正曲线的线性范围为0.08ng/mL~5ng/mL。该方法的加标回收率为80.0%~128.3%。
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