乳中大肠杆菌O157:H7的荧光定量PCR检测方法的建立

被引：5

作者：

张微

姚笛

侯婷婷

郭瑜

佐兆杭

刘鑫

机构：

[1] 黑龙江八一农垦大学食品学院

来源：

中国乳品工业 | 2015年 / 43卷 / 07期

关键词：

大肠杆菌O157:H7; 荧光定量PCR; rfbE基因;

D O I：

暂无

中图分类号：

TS252.7 [产品标准与检验];

学科分类号：

摘要：

利用荧光定量PCR技术,建立快速、有效的检测乳中大肠杆菌O157:H7的方法。根据大肠杆菌O157:H7的rfb E基因序列设计一对特异性引物,以大肠杆菌O157:H7的DNA为模板进行PCR扩增,将目的基因进行克隆和测序,利用提取的重组质粒进行荧光定量PCR标准曲线的制备,建立荧光定量PCR的检测方法,并进行了灵敏性和特异性检测。结果显示:建立的荧光定量PCR方法特异性强,且灵敏度可达10-6ng/u L,利用建立的方法可检测到乳中67.0 m L-1的大肠杆菌O157:H7。该方法能够使乳中大肠杆菌的检测更为快速,并且更加准确和灵敏。

引用

页码：52 / 54

页数：3

共 8 条

[1] 肠出血性大肠杆菌O157:H7检测技术进展
王培育
周梅
[J]. 国际检验医学杂志, 2013, 34 (19) : 2570 - 2572
[2] Polymerase chain reaction idemification of enteroinasive Escherichia coli seeded into raw milk. KEASLER S P,WALTER E H. Food Protection Trends . 1992
[3] Human response to Escherichia coli O157:H7 infection: antibodies to secreted virulence factors. Li Y,Frey E,Mackenzie A M,et al. Infection and Immunity . 2000
[4] Validation of a method for the detection of E. coli O157:H7 in foods[J] . S Scotter,M Aldridge,K Capps. &nbspFood Control . 2000 (2)
[5] Comparison of different PCR tests for detecting Shiga toxin-producing Escherichia coli O157 and development of an ELISA-PCR assay for specific identification of the bacteria
Fach, P
Perelle, S
Grout, J
Dilasser, F
[J]. JOURNAL OF MICROBIOLOGICAL METHODS, 2003, 55 (02) : 383 - 392
[6] 江苏省1999年大肠埃希菌O157∶H7宿主动物带菌情况调查
倪大新
汪华
顾玲
郭喜玲
庄菱
施平
潘浩
史智扬
胡晓抒
刘光中
[J]. 中华流行病学杂志, 2002, (02) : 27 - 29
[7] 漳州市首次检出O157∶H7大肠杆菌
林鹭芳
黄健利
钟凌
[J]. 海峡预防医学杂志, 2002, (04) : 52 - 52
[8] 大肠杆菌O157∶H7检测技术的概况
孙强
李昱洁
任科研
邵洪泽
[J]. 吉林畜牧兽医, 2013, 34 (07) : 61 - 62

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