树状多节孢的双亲灭活原生质体融合

被引：12

作者：

孙剑秋

周东坡

马玉超

李晶

解玉红

张鹏

平文祥

机构：

[1] 齐齐哈尔大学生命科学与工程学院

[2] 黑龙江大学生命科学学院齐齐哈尔

[3] 齐齐哈尔

来源：

菌物系统 | 2002年 / 03期

基金：

黑龙江省自然科学基金;

关键词：

树状多节孢; 原生质体; 融合; 灭活;

D O I：

10.13346/j.mycosystema.2002.03.023

中图分类号：

Q813.2 [细胞融合工程];

学科分类号：

0836 ; 090102 ;

摘要：

以紫杉醇产生菌树状多节孢HQD33的诱发突变株UL50-6和UL40-19 为出发菌株,将收集到的出发菌株UL50-6和UL40-19的菌丝体分别用pH5.5～6.0的0.7mol/L NaCl配制的3%溶壁酶、2%蜗牛酶、1%溶菌酶组成的复合酶系,30℃恒温酶解3～5h,制备原生质体。两菌株的原生质体经纯化后分别用热和紫外线灭活,其中UL50-6的原生质体在54℃热灭活5分钟,UL40-19的原生质体在30W紫外灯下,30cm,照射85秒进行紫外灭活,双亲株的原生质体存活再生率为零。同时对融合条件进行了初步探索,以含有Ca2+和Gly的35%40%的PEG作为融合剂,融合时间为20分钟时,融合率可以达到4.44?0-2～6.92?0-2。对融合株TPF-1与双亲株的形态学、可溶性蛋白、过氧化物同工酶进行分析,确证其为双亲株的融合子。

引用

页码：430 / 436

页数：7

共 13 条

[1] 树状多节孢原生质体的制备和再生 [J].