生地、山茱萸抑制和清除糖基化产物的效应成分研究

目的:糖基化终末产物(AGEs)是糖尿病的主要物质基础,在加速糖尿病及其并发症的进程中发挥了核心作用,本实验观察生地、山茱萸效应成分对体外AGEs生成与清除的影响。方法:加入葡萄糖(终浓度为200mmol/L)和牛血清白蛋白(终浓度40g/L)37℃温孵2周后,于530nm处测定早期糖化蛋白(果糖胺);37℃温孵4周后于激发波长360nm,发射波长460nm处测定AGEs的荧光度值(F),建立体外AGEs生成模型;加入葡萄糖(终浓度为200mmol/L)和牛血清白蛋白(终浓度40g/L)后37℃温孵16h,采用酶联免疫吸附测定法,于450nm处测定OD值,建立AGEs清除模型。再分别加入生地效应成分(梓醇、水苏糖、毛蕊花糖苷),山茱萸效应成分(马钱苷、莫诺苷、熊果酸、齐墩果酸、獐牙菜苷),使其终浓度为1×10-5、5×10-6、1×10-6、5×10-7、1×10-7mol/L;氨基胍(1×10-5、5×10-6、1×10-6、5×10-7、1×10-7mol/L)作阳性对照。结果:在体外AGEs生成模型中,发现生地梓醇、水苏糖,山茱萸熊果酸对果糖胺抑制作用较强,IC50分别为4.2×10-8、9.4×10-8、5.7×10-8,而山茱萸马钱苷对AGEs生成的抑制作用较强,IC50为6.1×10-7。在体外AGEs清除模型中,发现山茱萸有效成分熊果酸、生地有效成分毛蕊花糖苷抑制作用最强,浓度为1×10-5mol/L时,抑制率分别为16.8%、17.4%。结论:生地、山茱萸各特征成分对抑制AGEs生成和清除AGEs交联结构都有一定的作用,但各有效成分作用靶点、作用环节不同,为生地、山茱萸两药合用在临床上治疗糖尿病及并发症提供了有效的依据。