非洲猪瘟病毒p54基因的原核表达及其抗体的间接ELISA检测方法的建立

被引:23
作者
曹琛福 [1 ,2 ]
梁云浩 [3 ]
陶虹 [2 ]
花群义 [2 ]
曾少灵 [2 ]
杨俊兴 [2 ]
陈兵 [2 ]
张桂红 [1 ]
吕建强 [2 ]
机构
[1] 华南农业大学兽医学院
[2] 深圳出入境检验检疫局动植物检验检疫技术中心
[3] 暨南大学生命科学技术学院
关键词
非洲猪瘟病毒; p54基因; 原核表达; 间接ELISA;
D O I
10.16437/j.cnki.1007-5038.2014.02.002
中图分类号
S852.651 [];
学科分类号
090601 ;
摘要
将非洲猪瘟病毒P54基因克隆到原核表达载体pET-52b(+)3C/LIC中,转入BL21(DE3)菌中诱导表达,对表达蛋白进行SDS-PAGE和Western blot分析的结果表明,表达蛋p54的分子质量约为28ku,具有很好的抗原性。纯化p54蛋白后,采用2.5μg/mL浓度作包被抗原,建立了检测非洲猪瘟p54抗体的间接ELISA方法,结果表明建立的间接ELISA方法特异性、敏感性都较好。
引用
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Galindo-Cardiel, Ivan ;
Ballester, Maria ;
Solanes, David ;
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Lopez-Soria, Sergio ;
Argilaguet, Jordi M. ;
Lacasta, Anna ;
Accensi, Francesc ;
Rodriguez, Fernando ;
Segales, Joaquim .
VIRUS RESEARCH, 2013, 173 (01) :180-190
[2]  
Indirect sandwich ELISA for antigen detection of African swine fever virus: Comparison of polyclonal and monoclonal antibodies.[J].Geoffrey H. Hutchings;Nigel P. Ferris.Journal of Virological Methods.2005, 2
[3]   Neutralizing antibodies to African swine fever virus proteins p30, p54, and p72 are not sufficient for antibody-mediated protection [J].
Neilan, JG ;
Zsak, L ;
Lu, Z ;
Burrage, TG ;
Kutish, GF ;
Rock, DL .
VIROLOGY, 2004, 319 (02) :337-342
[4]  
动物病毒学.[M].殷震;刘景华主编;.科学出版社.1997,
[5]   非洲猪瘟病原学及单克隆抗体制备技术研究进展 [J].
陈轶 ;
王君玮 ;
曹金山 ;
邹艳丽 ;
吴晓东 .
畜牧与饲料科学, 2012, 33 (04) :93-95+124
[6]   非洲猪瘟研究进展 [J].
王志亮 .
中国动物检疫, 2011, 28 (06) :70-74
[7]   非洲猪瘟病毒衣壳蛋白P72在大肠杆菌中的表达 [J].
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龚振华 ;
刘俊辉 ;
郭福生 ;
郑增忍 .
中国预防兽医学报, 2006, (03) :267-270
[8]   不同非洲猪瘟病毒株j5R基因及其编码蛋白的比较 [J].
孙怀昌 ;
Linda KDixon ;
R M E Parkhouse .
中国预防兽医学报, 1999, (02) :38-40