重组人组织型纤溶酶原激活剂(rht-PA)及其突变体的纯化

被引：3

作者：

朱恒奇

徐秀英

黄培堂

机构：

[1] 军事医学科学院生物工程研究所,军事医学科学院生物工程研究所,军事医学科学院生物工程研究所北京,北京,北京

来源：

中国生物化学与分子生物学报 | 2003年 / 01期

关键词：

组织型纤溶酶原激活剂; 突变体; 纯化;

D O I：

10.13865/j.cnki.cjbmb.2003.01.018

中图分类号：

Q51 [蛋白质];

学科分类号：

071010 ; 081704 ;

摘要：

稳定高效表达重组人组织型纤溶酶原激活剂 (rht PA)的CHO细胞株和表达组合突变体的细胞株进行了 3L转瓶培养 .将培养上清分别进行了Lys Sepharose 4B亲和层析和Zn2 + Sepharose 4B层析两步纯化 ,rht PA纯度提高了 5 34倍 ,比活达 2 5× 10 5IU mg ,产率为 73% ;突变体纯度提高了1119倍 ,比活达 5 9× 10 5IU mg ,产率为 6 9% .纯化产物SDS PAGE分析显示 ,rht PA和突变体基本都呈单一条带 ,扫描分析均达到 98%以上纯度 .rht PA和突变体在纯化系统中的行为作对照分析发现 ,突变体的构建思想在Lys Sepharose 4B亲和层析过程中有充分体现 .这两步层析组合是很好的纯化t PA及其突变体的方法 ,尤其是Lys Sepharose 4B纯化突变体效果更好

引用

页码：82 / 86

页数：5

共 10 条

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