酸奶中β-内酰胺酶的快速检测方法

目的建立酶热生物传感器法用于快速检测酸奶中β-内酰胺酶。方法酸奶样品于4℃下5 000 r/min离心10 min,取中间层清液与一定量青霉素G混合,室温震荡反应3 h,使样品中β-内酰胺酶充分酶解加入的青霉素G底物,然后直接通过酶热生物传感器进行分析。酶热生物传感器中装备有专一性酶柱,能够特异性地与青霉素G进行反应,并对其含量进行测定。根据震荡反应前后酸奶样品中青霉素G含量的变化,可以推算出酸奶样品中β-内酰胺酶的活性。结果该方法样品检出限为2 U/ml,定量限为4 U/ml;线性范围4～20 U/ml,3个加标水平(6 U/ml、10 U/ml、18 U/ml)的平均回收率在85%～110%之间,相对标准偏差小于20%。结论本文所建立的酶热生物传感器法能够快速测定酸奶中β-内酰胺酶活性,与传统微生物法相比,操作简单、仪器可便携,显著节约了检测时间和成本,是传统方法的有力补充,更适合于大规模样品筛查和现场检测。