枯草芽孢杆菌抗脯氨酸结构类似物突变株的筛选及突变株proBA基因的克隆和序列分析

被引：3

作者：

苗丽霞

曹军卫

刘瑞杰

王友亮

曾永辉

机构：

[1] 武汉大学生命科学学院生物技术系,武汉大学生命科学学院生物技术系,武汉大学生命科学学院生物技术系,武汉大学生命科学学院生物技术系,武汉大学生命科学学院生物技术系武汉,武汉,武汉,武汉,武汉

来源：

遗传学报 | 2002年 / 12期

关键词：

枯草芽孢杆菌; 突变; proBA基因;

D O I：

暂无

中图分类号：

Q75 [分子遗传学];

学科分类号：

071007 ;

摘要：

利用亚硝基胍对枯草芽孢杆菌 9315 1进行诱变处理 ,获得了耐NaCl浓度达 14 %的突变株 ,同时发现该突变株也是一个抗脯氨酸反馈抑制突变菌株。其胞内自由脯氨酸的含量随着盐浓度的提高显著增加 ,说明其对渗透压的耐受能力与胞内自由脯氨酸的含量紧密相关。利用PCR方法克隆突变株的proBA基因 ,得到一个约 2 3kb的DNA片段 ,序列分析表明该片段含有一完整的proB基因和部分proA基因。与野生菌株的proB基因相比 ,突变株proB基因中有3个碱基发生了改变 ,其中一个碱基的变化 (从起始密码子开始第 781位由T→A)导致了一个氨基酸发生改变 (Ser→Thr) ,另外两个碱基变化为沉默位点突变。将该proB基因转入大肠杆菌脯氨酸营养缺陷型菌株 ,能够与其功能互补。同时对部分proA基因序列分析发现 ,其与proB基因头尾重叠 ,在proA基因起始密码子上游第 14个碱基处有一个类似于SD的序列 ,其所编码的氨基酸序列与枯草芽孢杆菌 16 8的同源性为 77%

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[2]

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