银杏第1染色体DNA文库的构建

被引:10
作者
黄代青
吕柳新
王平
机构
[1] 福建农林大学园艺学院
[2] 福建农林大学园艺学院
关键词
银杏; 第1染色体; 微分离微克隆; 单染色体DNA文库;
D O I
暂无
中图分类号
Q943 [植物细胞遗传学];
学科分类号
071007 ; 090102 ;
摘要
观察了50个银杏根尖的染色体,发现在约半数根尖中,最大的1对染色体(第1染色体)随体有差异,其中1条随体较大而明显,另1条则很小.采用玻璃针分离法,通过显微操作系统成功地分离了随体较为明显的那条第1染色体.将分离到的单条染色体去蛋白,Sau3A酶切,并在染色体DNA片段两端加上Sau3A人工接头,进行2轮PCR扩增,得到了大小为300-3000bp的扩增片段.用第2轮PCR产物构建质粒文库,得到了约含有75000个重组子的该染色体DNA文库.随机挑取66个重组子进行分析,发现插入片段大小主要分布在500-2000bp,平均为800bp.该文库为银杏第1染色体特异探针的筛选、遗传图谱的构建、重要基因的克隆以及性染色体的鉴别等研究提供了基础.
引用
收藏
页码:490 / 494
页数:5
相关论文
共 10 条
[1]   柚(Citrus grandis Osbeck)第一染色体的显微分离 [J].
黄代青 ;
吕柳新 ;
周奕华 .
农业生物技术学报, 2002, (01) :53-55
[2]   植物染色体微分离微克隆技术研究进展与展望 [J].
吕柳新 ;
黄代青 .
福建农业大学学报, 2001, (03) :340-346
[3]   黑麦1R染色体微克隆文库的构建与分析 [J].
周奕华 ;
党本元 ;
王槐 ;
胡赞民 ;
王兰岚 ;
陈正华 .
植物学报, 1999, (12) :1269-1275
[4]   水稻第5染色体短臂端四体在染色体臂微分离中的应用 [J].
程祝宽 ;
颜辉煌 ;
党本元 ;
胡赞民 ;
顾铭洪 ;
朱立煌 .
科学通报, 1998, (03) :272-276
[5]   王百合单染色体DNA文库的构建 [J].
党本元 ;
胡赞民 ;
周奕华 ;
崔丽华 ;
王兰岚 ;
李良材 ;
陈正华 .
科学通报, 1998, (02) :194-199
[6]   一种木本果树基因组DNA提取方法研究 [J].
陈大明 ;
张上隆 ;
金勇丰 .
浙江农业大学学报, 1997, (06) :13-16
[7]   银杏雌雄株核型及性别早期鉴定 [J].
陈学森,邓秀新,章文才,张艳敏 .
果树科学, 1997, (02) :87-90
[8]  
精编分子生物学实验指南[M]. 科学出版社 , (美)F.M.奥斯伯等主编, 2005
[9]  
Microdissection and microcloning of the barley ( Hordeum vulgare L.) chromosome 1HS[J] . J. Schondelmaier,R. Martin,A. Jahoor,A. Houben,A. Graner,H. -U. Koop,R. G. Herrmann,C. Jung.Theoretical and Applied Genetics . 1993 (5)
[10]  
Characterization of a library from a single microdissected oat(Avena sativa L.) chromosome .2 Chen Q,Armstrong K. Genome . 1995