衰老大鼠模型骨髓基质细胞的生物学特点

被引：13

作者：

景鹏伟 ^{[1
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胡文煦 ^{[1
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宋小英 ^{[1
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张岩岩 ^{[1
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贾道勇 ^{[1
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张梦思 ^{[1
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夏婕妤 ^{[1
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李静 ^{[2
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王亚平 ^{[1
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王璐 ^{[1
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机构：

[1] 重庆医科大学组织学胚胎学教研室

[2] 重庆医科大学病理生理学教研室

来源：

解剖学报 | 2015年 / 46卷 / 01期

关键词：

衰老; 微环境; 骨髓基质细胞; 免疫印迹法; 大鼠;

D O I：

10.16098/j.issn.0529-1356.2015.01.008

中图分类号：

R-332 [医用实验动物学]; R339.38 [];

学科分类号：

1001 ; 071008 ;

摘要：

目的探讨衰老大鼠骨髓基质细胞(BMSCs)的生物学特点,为阐释机体衰老对造血诱导微环境的影响提供实验依据。方法雄性健康SD大鼠随机分为正常组和衰老模型组。衰老模型组:大鼠皮下注射D-半乳糖120mg/kg,qd×42;正常对照组:大鼠皮下注射等时与等量生理盐水。衰老动物复制完成后第2天,分离骨髓单个核细胞(BMNCs)进行髓系造血祖细胞混合集落生成单位(CFU-Mix)培养。采用全骨髓贴壁法培养和传代BMSCs,取第3代细胞进行检测,CCK-8法测定BMSCs增殖能力;流式细胞术分析细胞周期;衰老相关β-半乳糖苷酶(SA-β-Gal)染色观察衰老BMSCs百分率;ELISA检测细胞培养上清液中白细胞介素(IL)-6、干细胞生长因子(SCF)含量;DCFH-DA荧光染色流式检测BMSC活性氧簇(ROS)水平;酶学法检测BMSCs内过氧化物丙二醛(MDA)含量和总超氧化物歧化酶(SOD)活性;Western blotting检测衰老相关蛋白P16、P21、P53表达。结果与对照组相比衰老模型组大鼠CFU-Mix集落形成数量明显降低;BMSCs增殖能力显著下降;处于G0/G1期的BMSCs比例增高、S期细胞比例降低,细胞阻滞于G1期;SA-β-Gal染色阳性的BMSCs百分率显著上升;BMSCs培养上清液中IL-6、SCF含量明显下降;BMSC内ROS、MDA氧化损伤指标上升,SOD抗氧化指标下降;衰老相关蛋白P16、P21、P53表达明显上调。结论衰老大鼠骨髓基质细胞表现衰老相关生物学改变,其机制可能与氧化损伤激活衰老信号通路有关。

引用

页码：44 / 50

页数：7

共 11 条

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