目的采用高效液相色谱法测定小柴胡汤中黄芩苷、汉黄芩苷的含量。方法饮片粉末用水回流提取,色谱柱:Agilent Zorbax XDB-C18(150mm×4.6mm,5μm);流动相为乙腈和水;A相为0.2%磷酸-水,B相为乙腈,梯度洗脱;流速1ml/min,柱温25℃,检测波长275nm,进样量15μl。结果黄芩苷和汉黄芩苷在30min内基线分离。以峰面积(Y)对浓度(X)的标准曲线分别为:黄芩苷Y=44.16X-36.22(r=0.9999);汉黄芩苷Y=52.08X-28.69(r=0.9999)。日内及日间精密度均小于1%,黄芩苷和汉黄芩苷的定量限分别为0.6156μg/ml和0.2208μg/ml,黄芩苷和汉黄芩苷加样回收率(n=6)分别为95.73%(RSD=0.8%)及97.02%(RSD=1.56%)。结论该方法稳定性好,测定结果准确可靠,可用于小柴胡汤的质量控制研究。