一测多评法测定银杏叶片中小分子有机酸含量

目的:建立银杏叶片剂中5种小分子有机酸[莽草酸、没食子酸、原儿茶酸、6-羟基犬尿喹啉酸（6-HKA）、对羟基苯甲酸]的一测多评含量测定方法。方法:采用ZORBAX Eclipse XDB-C8色谱柱（250 mm×4.6 mm,5μm）,以0.1%磷酸水溶液（A）-乙腈（B）为流动相,梯度洗脱（0～25 min,3.5%B;25～26 min,3.5%B→70%B;26～35 min,70%B;35～36 min,70%B→3.5%B;36～60 min,3.5%B）,流速1 mL·min-1,波长切换测定（0～6 min:215 nm,检测莽草酸、没食子酸;6～60 min:254 nm,检测原儿茶酸、6-HKA、对羟基苯甲酸）,柱温30℃。以原儿茶酸为内参物,分别建立莽草酸、没食子酸、6-HKA、对羟基苯甲酸的相对校正因子,并对相对校正因子进行重现性考察;采用外标法测定原儿茶酸的含量,利用相对校正因子计算其他4种小分子有机酸含量,同时采用外标法测定15批银杏叶片剂中5种小分子有机酸含量,比较2种方法的测定结果。结果:莽草酸、原儿茶酸、没食子酸、6-HKA、对羟基苯甲酸的线性范围分别为43.9～1 097.5、13.2～330.0、141.6～3 540.0、11.3～282.5、12.9～322.5 ng;在以上线性范围内,原儿茶酸与莽草酸、没食子酸、6-HKA、对羟基苯甲酸的相对校正因子分别为1.147 4、0.416 8、0.504 3、0.552 2;且在不同实验条件下重现性良好。15批银杏叶片剂中5种小分子有机酸含量的计算值（莽草酸0.11%1.01%,没食子酸0.13%0.26%,6-HKA 0.15%0.32%,对羟基苯甲酸0.07%0.18%）与实测值无显著差异。结论:经方法学验证,本文方法可用于银杏叶片剂中小分子有机酸莽草酸、没食子酸、原儿茶酸、6-羟基犬尿喹啉酸（6-HKA）、对羟基苯甲酸的含量测定。