HPLC直接进样测定咖啡因代谢物评价三种药物代谢酶活性

目的:建立测定尿中咖啡因的5种主要代谢物:5-乙酰氨基-6-甲酰氨基-3-甲基尿酸(AFMU)、1-甲基尿酸(1U)、1-甲基黄嘌呤(1X)、1,7-二甲基尿酸(17U)和1,7-二甲基黄嘌呤(17X)的高效液相色谱法,以评价N-乙酰基转移酶(NAT2)、细胞色素P450酶1A2(CYP1A2)和黄嘌呤氧化酶(XO)三种药物代谢酶的活性。方法:采用反相高效液相梯度洗脱法直接进样测定尿液内咖啡因代谢产物AFMU、1U、1X、17U和17X的相对含量,计算AFMU/(AFMU+1X+1U)(、AFMU+1X+1U)/17U和1U/(1X+1U),绘制概率分布直方图,分别反映NAT2、CYP1A2和XO的活性。结果:NAT2活性呈两态分布,快、慢乙酰化代谢表型的临界点为0.26,CYP1A2和XO酶活性呈近似正态分布。结论:本方法简便、准确、快速,适合于尿中咖啡因代谢物的测定及NAT2、CYP1A2和XO等药物代谢酶活性的研究。