桃不同发育时期叶片总RNA提取方法的比较

被引：11

作者：

王其海 ^{[1
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王裔娜 ^{[1
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刘晓华 ^{[1
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吴文江 ^{[2
]}

丁宁 ^{[1
]}

牛洪斌 ^{[3
]}

王林忠 ^{[1
]}

吴国良 ^{[1
]}

机构：

[1] 河南农业大学园艺学院

[2] 河南农业大学食品科技学院

[3] 河南农业大学国家小麦工程技术研究中心

来源：

河南农业科学 | 2014年 / 43卷 / 03期

关键词：

桃叶片; RNA提取; Trizol法; 改良CTAB法; 改良SDS-苯酚法;

D O I：

10.15933/j.cnki.1004-3268.2014.03.029

中图分类号：

S662.1 [桃];

学科分类号：

090201 [果树学];

摘要：

为了从桃叶片中提取到高质量的RNA,以进行反转录、RT-PCR等后续分子生物学试验,选取了改良硼砂-CTAB法、改良CTAB法、改良SDS-苯酚法、试剂盒法、Trizol法,以及在试验中探索的改良Trizol法Ⅰ和改良Trizol法Ⅱ对桃不同发育时期的叶片总RNA进行提取,测定RNA样品的OD值,结合琼脂糖凝胶电泳检测总RNA样品的质量。结果表明,这些方法虽然都能获得桃叶片总RNA,但是或存在不同程度的DNA残留,或有蛋白、多糖等杂质污染,或降解严重;而改良的Trizol法提取总RNA的完整性和纯度较好;针对生长期和衰老期叶片的不同生理特性可分别采用改良Trizol法Ⅰ和改良Trizol法Ⅱ,提取的总RNA反转录后,通过RT-PCR检测,条带明亮清晰,与预期目的基因片段大小一致,说明这2种方法提取的总RNA能用于后期的分子生物学试验。

引用

页码：116 / 120

页数：5

共 21 条

[1]

Simple isolation of functional RNA from woody stems of gymnosperms.[J].Efraim Lewinsohn;Christopher L. Steele;Rodney Croteau.Plant Molecular Biology Reporter.1994, 1

[2]

榛子总RNA提取方法的比较研究 [J].