掌叶半夏凝集素基因PPA2抗蚜功能分析

被引：18

作者：

刘玎 ^{[1
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陈劲 ^{[1
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刘志 ^{[1
]}

朱生伟 ^{[2
]}

机构：

[1] 湖南农业大学生物科学技术学院

[2] 中国科学院植物研究所植物分子与生理学重点实验室

来源：

生物技术通报 | 2016年 / 32卷 / 10期

关键词：

掌叶半夏凝集素; 基因克隆; 转基因烟草; 抗蚜基因;

D O I：

10.13560/j.cnki.biotech.bull.1985.2016.10.022

中图分类号：

Q943.2 [植物基因工程]; S432.23 [];

学科分类号：

071007 [遗传学];

摘要：

掌叶半夏凝集素(Pinellia pedatisecta Agglutinin,PPA)基因属于单子叶甘露糖结合凝集素家族,具有抗虫活性。采用反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)技术从掌叶半夏幼叶中克隆到1个新的凝集素基因,命名为PPA2,其开放阅读框长408 bp,编码135个氨基酸,有一个甘露糖保守结合域,包含3个甘露糖专一结合位点。分别构建了由35S启动子和韧皮部特异性启动子At PP2驱动的植物表达载体,农杆菌介导的叶盘法转化烟草后,经鉴定获得了单拷贝插入高表达量的纯合转基因烟草株系。通过Western-blot分析,将获得的转基因纯合株系按蛋白表达水平分成高、中、低3类并进行抗蚜试验,结果表明这些转基因烟草均具有明显抗蚜效果,35S-PPA2转基因植株平均抑蚜率极高,而3种蛋白表达类型的At PP2-PPA2转基因植株普遍低于35S启动子驱动下的转基因植株。PPA2可以作为高效抗蚜候选基因,具有重要的应用价值。

引用

页码：180 / 187

页数：8

共 16 条

[1]

异源韧皮部特异启动子在转基因枳中的表达 [J].