半夏凝集素基因克隆及其对桃蚜的抗性研究

被引:22
作者
吴志明 [1 ,2 ]
董文琦 [2 ]
党志红 [3 ]
潘文亮 [3 ]
谢晓亮 [2 ]
温春秀 [2 ]
陈劲枫 [1 ]
机构
[1] 南京农业大学作物遗传与种质创新国家重点实验室/园艺学院
[2] 河北省农林科学院经济作物究所
[3] 河北省农林科学院植物保护研究所
关键词
半夏凝集素; 基因克隆; 转基因烟草; 抗性; 桃蚜;
D O I
暂无
中图分类号
S336 [生物技术育种方法];
学科分类号
090102 [作物遗传育种];
摘要
研究了半夏凝集素(Pinellia ternataagglutinin,PTA)基因对桃蚜(Myzus persicae)的抗性。从半夏幼叶中提取总RNA,采用RT-PCR法分离克隆出PTA1基因cDNA片段,该基因在GenBank中登录号为DQ092435。序列分析表明:该cDNA片段全长为810bp,编码269个氨基酸组成的蛋白,具有单子叶植物甘露糖凝集素基因家族的特征,含有3个由4个氨基酸(QDNY)组成的甘露糖专一结合位点,与报道的天南星科凝集素基因氨基酸序列的同源性在72.7%92.9%。构建了35S启动子控制下的PTA1基因的植物表达载体pBI121PTA1,该载体含有抗卡那霉素的选择标记基因(nptⅡ),利用根癌农杆菌介导法转化烟草获得抗卡那霉素的植株。PCR和半定量RT-PCR分析表明:PTA1基因已经整合到植物基因组中并在转录水平上得到了有效表达。抗蚜虫鉴定表明:转基因植株有效地抑制了蚜虫的群体增长率,平均抑制率达77.02%,表明该基因对同翅目害虫的抗虫基因工程有重要的应用价值。
引用
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