去甲斑蝥素诱导人食管癌Eca-109细胞凋亡及其作用机制

目的:探讨去甲斑蝥素诱导人食管癌Eca-109细胞的凋亡及其可能的作用机制。方法:去甲斑蝥素作用食管癌Eca-109细胞后,应用MTT法检测其对细胞的生长抑制作用,透射电子显微镜下观察细胞超微结构的变化,琼脂糖凝胶电泳观察其对细胞凋亡的诱导作用,RT-PCR法检测caspase8和caspase3mRNA的表达,Western印迹法检测Fas、细胞型含死亡域的Fas结合蛋白样白介素-1β转换酶抑制蛋白(cellular FADD-like interleukin-1βconverting enzyme inhibitory protein,c-FLIP)、caspase8和caspase3蛋白的表达。结果:去甲斑蝥素对人食管癌Eca-109细胞具有生长抑制作用,并呈时效和量效依赖关系。电子显微镜下观察发现,食管癌Eca-109细胞趋于凋亡。DNA琼脂糖凝胶电泳可见典型的DNA梯状条带。RT-PCR检测显示,caspase8和caspase3mRNA的表达水平明显上升(P<0.01)。Western印迹法检测结果显示,与阴性对照组比较,去甲斑蝥素作用后,食管癌Eca-109细胞中Fas、caspase3和caspase8蛋白的表达明显上升(P<0.05),c-FLIP蛋白的表达水平明显下降(P<0.05)。结论:去甲斑蝥素能够抑制食管癌Eca-109细胞的生长并诱导其凋亡,其机制可能是通过上调Fas、caspase8、caspase3的表达和下调c-FLIP的表达来实现的。