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应用寡核苷酸芯片技术检测食源性感染常见致病菌
被引:12
作者:
洪帮兴
江丽芳
胡玉山
方丹云
陶剑平
郭辉玉
机构:
[1] 中山大学中山医学院微生物学教研室
[2] 中山大学中山医学院微生物学教研室 广州
[3] 广州
来源:
基金:
广东省自然科学基金;
关键词:
寡核苷酸序列分析;
感染控制;
核酸杂交;
D O I:
暂无
中图分类号:
R446.5 [微生物学检验];
学科分类号:
100208 ;
摘要:
目的建立食源性感染常见致病菌的快速检测方法。方法利用带正电荷尼龙膜为芯片载体,合成寡核苷酸探针,点样于载体制成寡核苷酸芯片,对食源性感染常见致病菌23SrDNA基因片段扩增产物进行杂交检测。结果在同一条件下运用设计的通用引物扩增出16种(属)细菌23SrDNA基因片段。大肠埃希菌、沙门菌、志贺菌、霍乱弧菌、副溶血弧菌、变形杆菌、单核细胞增生李斯特菌、蜡样芽孢杆菌、肉毒梭菌和空肠弯曲菌等10种(属)菌杂交结果显示,高灵敏度和特异性;金黄色葡萄球菌、链球菌、小肠结肠炎耶尔森菌和产气荚膜梭菌等4种(属)菌,未能显示预期的种(属)杂交结果;而应用食源性感染模拟标本,检测肺炎链球菌和绿脓假单胞菌两种与食源性感染无关的致病菌未与芯片上探针出现杂交反应,检出水平可达10CFU/ml。结论建立的寡核苷酸芯片技术在食源性感染常见致病菌的检测上快速准确等优点,为食源性感染的诊治与预防提供了有效的技术手段和方法依据。
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