三叶青提取物诱导人肝内胆管癌HCCC-9810细胞凋亡的研究

目的:探讨三叶青提取物(Extract from Tetrastigma hemsleyanum,ETH)诱导人肝癌HCCC-9810细胞凋亡的作用及相关机理。方法:MTT法测定不同浓度和时间ETH处理后HCCC-9810细胞的增殖抑制率;Hoechst33258染色法检验HCCC-9810细胞凋亡特征,流式细胞术检验不同浓度ETH处理HCCC-9810后细胞凋亡率的变化;Western-blot法检验ETH处理HCCC-9810后Pro-caspase3和胞浆细胞色素C的表达变化。结果:ETH对HCCC-9810细胞生长具有明显的剂量与时间依赖性抑制作用,ETH作用HCCC-9810细胞24 h、48 h和72 h后的IC50值分别为275.3 mg·L-1、183.3 mg·L-1、75.8 mg·L-1。随着ETH浓度增大细胞核出现染色质固缩,染色加深固缩等凋亡特征,细胞凋亡率逐渐增高,200 mg·L-1ETH,24 h处理组凋亡率为(33.5±8.1)%,胞浆细胞色素C表达逐渐增强和Caspase-3前体量的下降。结论:ETH诱导HCCC-9810细胞凋亡,其机制可能与激活Caspase及其介导的线粒体凋亡途径的激活有关。