胰腺癌肝转移与循环肿瘤细胞上皮-间质转化表型的关系

目的 :研究循环肿瘤细胞(circulating tumor cells,CTCs)的上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)表型和胰腺癌肝转移的关系。方法 :收集2010年1月—2013年12月第二军医大学附属长征医院普外科收治、术前影像学检查未发现肝转移且术后病理确诊为胰腺癌的患者,术后随访1年,根据随访期内有无肝转移将患者分为肝转移组和无肝转移组,每组随机选择50例患者。所有患者在术前均采集外周血样本,同时收集10名健康志愿者的外周血作为对照;然后采用免疫磁珠法富集并分离外周血标本中的CTCs,并用氨甲酰磷酸合成酶1(carbamoyl-phosphate synthetase 1,CPS1)抗体的免疫荧光法对CTCs进行鉴定。采用免疫荧光法检测各组患者外周血标本中EMT标志物Snail和Vimentin的表达情况,单因素和多因素分析这些标志物和胰腺癌肝转移的关系。结果 :10名健康志愿者的外周血标本中,CPS1、Snail和Vimentin均无表达;在50例胰腺癌肝转移组患者的外周血标本中,Snail阳性表达41例(82%),Vimentin阳性表达36例(72%);在50例胰腺癌无肝转移组患者的外周血标本中,Snail阳性表达10例(20%),Vimentin阳性表达6例(12%)。肝转移组的Snail和Vimentin阳性表达率均明显高于无肝转移组(χ2=38.455,P<0.01;χ2=36.946,P<0.01)。肝转移组中Snail和Vimentin的表达水平之间存在正相关性(r=0.657,P<0.01)。单因素分析显示,术前糖类抗原19-9(carbohydrate antigen 19-9,CA19-9)水平>37 k U/L、肿瘤直径≥4 cm、胰头肿瘤、血管浸润、Snail表达阳性和Vimentin表达阳性均与胰腺癌肝转移相关(P值均<0.05);多因素分析显示,术前CA19-9>37 k U/L(β=3.411,P<0.01)、Snail表达阳性(β=2.882,P<0.01)和Vimentin表达阳性(β=3.361,P<0.01)是胰腺癌肝转移的独立危险因素。结论 :胰腺癌患者外周血标本中CTCs-EMT表型标志物Snail和Vimentin的表达与其发生肝转移有密切关系。