缺血缺氧性新生大鼠皮层神经元胞浆Smac/Diablo、caspase-9的表达及参附注射液的干预作用

目的了解缺血缺氧性脑损伤(HIBD)新生大鼠神经元胞浆Smac/Diablo、caspase-9的变化及其相互关系,同时观察参附注射液的干预效果。方法 HIBD模型制作参照Rice等方法。新生7d SD大鼠按照完全随机数字表法分为假手术组、生理盐水对照组与参附治疗组,再按照造模后不同观察时间点又分为3h、6h、12h、24h、3d、7d 6个亚组,每亚组8只。参附治疗组于造模后即刻腹腔注射参附注射液10 mL/kg,1次/d,连续用药3d。生理盐水对照组用生理盐水替代参附注射液,用法用量相同;假手术组仅切开颈正中皮肤和分离右侧颈总动脉,不结扎,不缺氧。Westernblotting检测各时间点各组大鼠神经元胞浆中Smac/Diablo、活化caspase-9蛋白的表达。结果假手术组Smac/Diablo、caspase-9蛋白表达微弱。生理盐水对照组与参附治疗组2种蛋白造模后3h即明显增加,与假手术组比较,差异有统计学意义(P<0.05);24h时2种蛋白表达达到峰值,3d后明显下降,7d时接近假手术组。其中参附治疗组Smac/Diablo蛋白表达量12h、24h、3d、7d时较生理盐水对照组明显下降,差异有统计学意义(P<0.05);参附治疗组caspase-9蛋白12h、24h、3d时较生理盐水对照组明显下降,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 (1)HIBD新生大鼠脑皮层神经元存在Smac/Diablo蛋白胞浆转位,同时伴有胞浆活化caspase-9表达增加;参附可减少HIBD大鼠Smac/Diablo蛋白的胞浆转位,减少caspase-9的活化。(2)Smac/Diablo、caspase-9参与了HIBD新生大鼠迟发性神经元损伤的病理机制。