苎麻RAPD反应体系的构建与优化

被引:8
作者
刘立军
彭定祥
蒙祖庆
机构
[1] 华中农业大学植物科学技术学院中心实验室
关键词
苎麻; RAPD; 体系优化;
D O I
暂无
中图分类号
S563.1 [苎麻];
学科分类号
0901 ;
摘要
以苎麻品种为材料,研究了苎麻RAPD分析过程中的影响因素,包括10×PCRBuffer、模板浓度、Mg2+、dNTP、引物、Taq酶、循环次数、退火温度等,建立了适于苎麻RAPD分析的PCR反应体系:即在25μl反应体系中,引物浓度为0.4uM;模板DNA的用量为60~100ng;Mg2+浓度为1.8mM;dNTP浓度为0.2mM;Taq酶用量为1U。适宜的扩增程序为先94℃变性4min,再94℃变性45s、38℃复性45s、72℃延伸2min共36个循环,最后72℃延伸5min,4℃保存。
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