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黄杆菌(Flavobacteriumsp.)ATCC27551 opd基因在E.coli中的克隆及表达
被引:8
作者:
陈亚丽
张先恩
刘虹
机构:
[1] 中国科学院武汉病毒研究所!湖北武汉
来源:
关键词:
黄杆菌;
opd基因;
克隆及表达;
D O I:
10.14188/j.1671-8836.2001.02.018
中图分类号:
Q78 [基因工程(遗传工程)];
学科分类号:
071007 ;
0836 ;
090102 ;
摘要:
研究了黄杆菌 ATCC2 75 5 1的 opd基因在大肠杆菌中的表达 ,并对于表达产物进行了胞内定位和酶活测定 .通过 PCR扩增和 PCR产物直接克隆 ,将黄杆菌质粒上的一段长达 1137bp的 opd基因进行扩增及克隆 ,然后按正确的读码框亚克隆于表达载体 p ET2 8b(+ )上 ,转化宿主菌 E.coli BL 2 1(DE3) ,经 IPTG诱导 ,获得了较高量的基因表达产物 .该表达产物以包涵体的形式存在于细胞内 ,通过分离包涵体可以得到电泳较纯的条带 .工程菌的细胞活性达到原始菌株黄杆菌的水平
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