对虾肽Penaeidin-2在大肠杆菌中的融合表达及其抗细菌活性

被引:4
作者
付百玲
徐进平
孟小林
王健
鲁伟
机构
[1] 武汉大学生命科学学院/病毒学国家重点实验室
关键词
对虾; 原核表达; 抗菌活性;
D O I
10.14188/j.1671-8836.2006.06.018
中图分类号
Q789 [基因工程的应用];
学科分类号
摘要
采集南美白对虾血淋巴,从血细胞中提取总RNA,经RT-PCR扩增编码penaeidin-2成熟肽的开放阅读框cDNA序列,将其克隆至pGEM-T载体,进行序列测定,然后克隆至pET-32a(+)表达载体中,在E.coliOriga-mi B(DE3)pLysS中表达含6个His的重组对虾肽融合蛋白Pen-24,通过His Band resin Ni2+层析柱纯化获得Pen-24蛋白,采用纸片扩散法和液体生长抑制法检测该蛋白的抑菌活性.经SDS-PAGE分析,Pen-24蛋白的分子量为24.1×103.1μg对虾肽融合蛋白Pen-24与5 U的氨苄青霉素活性相当,对革兰氏阳性细菌、革兰氏阴性细菌和抗氨苄青霉素大肠杆菌均具有抑菌活性.
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