奇异变形杆菌噬菌体的分离鉴定及其生物学特性分析

目的分离鉴定奇异变形杆菌噬菌体,并分析其生物学特性。方法以奇异变形杆菌为宿主菌,采用双层琼脂噬斑法从居民区生活污水中分离针对奇异变形杆菌的噬菌体;噬菌体经纯化后,通过负染法电镜观察其形态及大小;将噬菌体和宿主菌以10∶1的比例混合共培养,测定噬菌体的一步生长曲线;提取噬菌体核酸并进行酶切分析。结果共分离出4株噬菌体,分别命名为PrM-01、PrM-02、PrM-03和PrM-04,在双层琼脂平板上可形成圆形、透明、边界清晰、直径约2～3 mm的噬斑,经反复纯化后,其滴度范围在(1.2～2.3)×1012PFU/ml;电镜观察显示,噬菌体的头部呈二十面体立体对称,直径约40 nm,尾部长约30 nm;PrM-04的一步生长曲线表明,噬菌体在裂解宿主菌时,潜伏期为15 min,暴发时间为25 min,裂解量为3.2×104;酶切分析显示,其基因组大小约为26 000 bp,且具有EcoRⅠ、HindⅢ和BamHⅠ多个酶切位点。结论成功分离出4株针对奇异变形杆菌的噬菌体,其表现出特异性高、裂解性强的毒性噬菌体特征。