EIA基因对肿瘤细胞放射敏感性的影响

目的 :利用外源性基因改变肿瘤原有的放射耐受性使其对放疗敏感 ,从而为提高肿瘤放射治疗疗效提供实验依据。方法 :利用本实验室构建的含腺病毒 (Ad5 )早期表达基因EIA的pCDNA3 E1A重组质粒转染肺腺癌Anip 973细胞 ,G418筛选后 ,经PCR ,RT PCR和免疫细胞化学染色鉴定 ,获得含EIA的阳性克隆。将未转染的Anip 973细胞、转染空载体质粒的Anip 973细胞和转染EIA的Anip 973细胞取 0、1、2、3、5、7、10GY剂量点 ,用6MV的X线单次照射以制作放射存活曲线 ;5GY单次照射后不同时间用MTT法测细胞存活。结果 :①转染后的阳性克隆细胞PCR ,RT PCR和免疫细胞化学染色结果说明 :EIA已整合到细胞基因组中并且稳定表达。②细胞放射存活曲线结果显示 :未转染的Anip 973细胞Do =1 14,Dq =1 5 3;空载体转染后的Anip 973细胞Do =1 13,Dq =1 44 ;EIA转染后的Anip 973细胞Do =1 0 2 ,Dq =0 8。未转染及空载体转染后的Anip 973细胞照射后细胞存活无明显差异 ,而EIA转染后的Anip 973细胞照射后细胞存活明显下降 ,存活曲线的肩区变窄 ,Dq值降低。③5GY照射后不同时间转染前后的细胞存活以 14小时最低 ,未转染的Anip 973细胞与转染EIA的Anip 973细胞 14小时存活率分别为 :6 9 5 %、41 5 %。经t检验均有显著差异。结论 :本实验的结