实时荧光定量RT-PCR检测白血病细胞WT1 mRNA方法的建立

被引：1

作者：

沈红强

汤永民

杨世隆

宋华

石淑文

徐卫群

钱伯芹

机构：

[1] 浙江大学医学院附属儿童医院白血病实验室

来源：

实用肿瘤杂志 | 2003年 / 05期

关键词：

癌基因; 逆转录-聚合酶链反应/方法; 荧光; 白血病; 细胞; RNA;

D O I：

10.13267/j.cnki.syzlzz.2003.05.010

中图分类号：

R733.7 [白血病];

学科分类号：

摘要：

目的　建立实时荧光定量 RT-PCR检测白血病细胞 WT1m RNA的方法。方法　在 PCR反应体系中加入了一条与靶基因序列互补的寡核苷酸双荧光标记探针 (5′端为荧光报告基团 ,3′端为荧光淬灭基团 ) ,建立实时荧光定量 RT-PCR检测白血病细胞 WT1m RNA的方法 ,并测试其特异性及敏感性。结果　所建立的实时荧光定量 RT-PCR检测 WT1m RNA的方法具有很好的准确性 ,检测 WT1m RNA的灵敏度达 10 - 4。方法的变异系数为1.93 % ,稳定性较好。循环阈值与 PCR体系中起始模板量的对数值之间有着良好的线性关系 (斜率为 -3 .5,线性相关系数 r=0 .997) ,可对 WT1m RNA的表达进行准确定量分析。结论　实时荧光定量 RT-PCR检测白血病细胞WT1m RNA的方法具有很好的特异性和敏感性 ,且操作简便、安全、快速

引用

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