微板式化学发光酶免疫分析法临床测定人血清中孕酮

被引:12
作者
任世奇 [1 ]
王栩 [2 ]
唐宝军 [3 ]
胡国茂 [3 ]
李振甲 [3 ]
陈国南 [1 ]
林金明 [2 ]
机构
[1] 福州大学化学化工学院
[2] 清华大学化学系
[3] 北京科美东雅生物技术有限公司
关键词
孕酮; 人血清; 化学发光酶免疫分析; 辣根过氧化物酶;
D O I
暂无
中图分类号
R446.6 [免疫学检验];
学科分类号
100208 ;
摘要
将抗兔IgG(即二抗)物理吸附于聚苯乙烯微孔板上作为通用固相,通过免疫反应制备固相抗体。采用辣根过氧化物酶催化鲁米诺-过氧化氢化学发光体系,建立了一种高通量、简便、快速的化学发光酶免疫分析方法用于临床测定人血清中的孕酮。对各种影响因素如免疫试剂的稀释度、发光底物选择、发光反应时间及温育条件等进行了考察和优化,最终选定的实验条件:孕酮抗体和HRP标记物的最佳稀释度分别为1∶100000和1∶15000;选用Ⅱ号发光底物,发光反应10min后测定;37℃水浴条件下温育1h。对建立的方法进行了评价。该方法的灵敏度为0.08μg/L;批内和批间相对标准偏差均在15%之内;低、中、高3个不同浓度值样品的平均回收率分别为101%、101%和94.4%(在87.8%~108%之间)。使用本方法和经典的放射免疫法同时对36份人血清样品进行测定,结果显示,本方法与放射免疫分析方法相关性良好,其相关系数为0.9502。
引用
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页数:6
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共 3 条
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