基于多指标综合检测优选藏药砂生槐子总生物碱提取工艺及其抗肝纤维化机制研究

目的:考察砂生槐子总生物碱最佳提取工艺,评价其抗肝纤维化作用。方法:采用HPLC法检测砂生槐子中氧化苦参碱、槐果碱、槐定碱和苦参碱的含量,利用L9(34)正交试验考察提取的最佳工艺。以CCl4诱导大鼠实验性肝纤维化,检测第3、6、9周空白组、模型组、秋水仙素组、砂生槐子高、中、低剂量组的ALT、AST、HA、TGF-β和Hyp指标,并对血清中miRNA-181b、miRNA-16、miRNA-200a、miRNA-126进行测定。结果:砂生槐子粉碎粒度60目,加15倍量70%乙醇加热提取2次,每次1 h,可得4种生物碱的含量分别为80.10、3.92、9.26、19.60μg/g。在实验周期内,砂生槐子高、中、低3个剂量组各检测指标均低于模型组,且具有浓度依赖性,表明总生物碱对肝纤维化有明显抑制作用,且与浓度成正相关。高剂量组miRNA-181b表达明显下降,miRNA-16、miRNA-200a、miRNA-126表达明显上升。结论:经正交试验优化提取可得最佳提取工艺,且总生物碱对CCl4诱导大鼠实验性肝纤维化有一定的治疗作用,且作用机制可能与其作用于肝星状细胞有关。