Rho/Rho激酶通路在5-羟色胺诱导的大鼠肺动脉平滑肌细胞增殖中的作用

被引:4
作者
陈雪彦 [1 ]
刘焕龙 [2 ]
潘振华 [1 ]
苗庆峰 [1 ]
张永健 [1 ]
机构
[1] 河北医科大学药理教研室
[2] 河北医科大学第二医院
关键词
Rho激酶; 5-羟色胺; 法舒地尔; 肺动脉平滑肌细胞; 增殖;
D O I
暂无
中图分类号
Q26 [细胞生物化学];
学科分类号
071009 ; 090102 ;
摘要
探讨Rho/Rho激酶通路在5-羟色胺(5-HT)诱导的大鼠肺动脉平滑肌细胞(PASMCs)增殖中的作用。采用细胞培养、噻唑蓝(MTT)比色法、蛋白质免疫印迹(Western blot)以及反转录聚合酶联反应(RT-PCR)等方法,研究不同浓度5-HT(0.01、0.1、1和10μmol/L)处理24 h后,大鼠PASMCs的增殖程度、增殖细胞核抗原(PCNA)的表达变化以及Rho激酶抑制剂法舒地尔对1μmol/L 5-HT诱导的PASMCs增殖的影响,并通过检测Rho激酶(ROCK1)mRNA表达及肌球蛋白磷酸酶目标亚单位1(MYPT1)磷酸化水平反映1μmol/L 5-HT作用不同时间Rho激酶的表达及活化程度。结果显示,在0.01~10μmol/L浓度范围内,5-HT可明显诱导大鼠PASMCs增殖(P<0.05或P<0.01),还可浓度依赖性地上调PCNA的表达(P<0.05或P<0.01)。1μmol/L 5-HT作用后明显诱导大鼠PASMCs中MYPT1磷酸化水平,在15 min时磷酸化水平达最高(P<0.01),也明显诱导了ROCK1 mRNA表达升高,在30 min时表达水平达最高(P<0.01)。Rho激酶抑制剂法舒地尔明显抑制了1μmol/L5-HT诱导的PASMCs的增殖。结果表明5-HT明显诱导了大鼠PASMCs中Rho激酶的表达及激活,法舒地尔对5-HT诱导的PASMCs的增殖有明显的抑制作用。说明Rho/Rho激酶在5-HT诱导的大鼠PASMCs增殖中起重要作用。
引用
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