独活中6种香豆素类成分在Caco-2细胞单层模型中的吸收转运研究

目的:研究独活中6种香豆素类成分（伞形花内酯、甲氧基欧芹素、二氢欧山芹素、二氢欧山芹醇乙酯、当归醇-A和当归醇-B）在人源结肠腺癌细胞系Caco-2细胞单层模型的吸收和转运。方法:采用Caco-2细胞单层模型研究6种香豆素类化合物由绒毛面（AP侧）到基底面（BL侧）和从BL侧到AP侧两个方向的转运过程,采用高效液相色谱法测定其在AP和BL侧的含量,计算表现渗透系数(apparent permeability coefficient,Papp),并与阳性对照药普萘洛尔和阿替洛尔进行比较。采用ATP耗竭剂碘乙酰胺和MRP2抑制剂MK571添加法探讨当归醇-B的转运机制。结果:6种香豆素类成分皆以被动扩散为主要方式被Caco-2细胞吸收、转运。伞形花内酯、甲氧基欧芹素、二氢欧山芹素、二氢欧山芹醇乙酯、当归醇-A和当归醇-B由AP侧到BL侧的Papp分别为（2.679±0.263）×10-5、（1.306±0.324）×10-5、（0.595±0.086）×10-6、（0.293±0.041）×10-6、（1.532±0.444）×10-5和（1.413±0.243）×10-5cm/s;由BL侧到AP侧的Papp分别为（3.381±0.410）×10-5、（0.898±0.134）×10-5、（0.510±0.183）×10-6、（0.222±0.025）×10-6、（1.203±0.280）×10-5和（0.754±0.092）×10-5cm/s。在本实验条件下,易吸收的阳性对照药普萘洛尔由AP侧到BL侧的Papp值为2.18×10-5cm/s,不易吸收的阳性对照药阿替洛尔由AP侧到BL侧的Papp值为2.77×10-7cm/s。上述6个香豆素类化合物中,伞形花内酯、甲氧基欧芹素、当归醇-A和当归醇-B的Papp值与普萘洛尔的Papp值在一个数量级;二氢欧山芹素和二氢欧山芹醇乙酯的Papp值在易吸收和不易吸收的阳性对照药之间。以EBSS代替HBSS作为转运介质,在碘乙酰胺和MK571存在下,当归醇-B从AP侧到BL侧和从BL侧到AP侧转运的Papp值与HBSS为转运介质的对照组相比皆没有统计学意义上的变化。回收率实验中,伞形花内酯的平均总回收率为（83.31±3.52）%、当归醇-A的平均总回收率为（77.39±7.38）%;甲氧基欧芹素、二氢欧山芹素和当归醇-B的平均总回收率在50%～65%之间,二氢欧山芹醇乙酯的平均总回收率低于10%。甲氧基欧芹素和二氢欧山芹素在Caco-2细胞中的蓄积率分别为（36.15±5.87）%和（53.90±4.39）%。结论:6种香豆素皆以被动扩散为主要方式被Caco-2细胞单层吸收和转运;伞形花内酯、甲氧基欧芹素、当归醇-A和当归醇-B是良好吸收的化合物,二氢欧山芹素和二氢欧山芹醇乙酯的吸收性属中等。在Caco-2细胞中,甲氧基欧芹素和二氢欧山芹素有蓄积,二氢欧山芹醇乙酯具有代谢不稳定性。当归醇-B的转运不受转运介质EBSS（pH 6.5）的影响,碘乙酰胺或MK571的存在亦不影响当归醇-B在两个方向的转运。