纳米金增强复杂体系中PCR扩增低拷贝基因的反应特异性初步研究

被引：6

作者：

李海阔 ^{[1
]}

曹雪雁 ^{[1
]}

周智磊 ^{[1
]}

陈恒 ^{[2
]}

机构：

[1] 上海交通大学生命科学技术学院Bio-X研究中心纳米生物学实验室

[2] 中国科学院上海生命科学信息中心

来源：

中国生物工程杂志 | 2009年 / 29卷 / 08期

基金：

国家自然科学基金重点项目;

关键词：

聚合酶链式反应; 纳米金; 特异性; 复杂体系; 低拷贝基因;

D O I：

10.13523/j.cb.20090813

中图分类号：

Q78 [基因工程（遗传工程）];

学科分类号：

071007 ; 0836 ; 090102 ;

摘要：

目的:利用纳米金颗粒提高复杂体系基因组低拷贝基因PCR扩增的反应特异性。方法:首先,模拟复杂基因组扩增模式体系,以接近单拷贝的λDNA为模板,在PCR过程中加入纳米金颗粒,设计优化实验,以便模拟建立复杂基因组低拷贝目的基因PCR扩增的模式体系。随后,扩增人类基因组的疾病相关的低拷贝基因模板(如人基因组肿瘤坏死因子基因外显子1的380bp),以检验纳米金优化增强PCR反应特异性的实际效果。结果:在复杂体系基因组的低拷贝基因PCR扩增中,纳米金颗粒能够较好地增强其PCR反应的特异性。结论:初步表明基于纳米金的纳米粒子PCR方法可以对复杂的实际基因组体系低拷贝基因的PCR扩增起到优化作用,这对于PCR反应优化方法的改进、推广具有重要的参考价值。

引用

页码：75 / 80

页数：6

共 14 条

[1]

Mullis,KB,Faloona,F.Specific synthesis of DNA in vitro via a polymerase-catalyzed chain reaction. Methods in Enzymology . 1987

[2]

Li M,Lin Y-C,Wu C-C,et al.Enhancing the efficiency of a PCR using gold nanoparticles. Nucleic Acids Research . 2005

[3] 硅对PCR过程的抑制作用研究 [J].

王玮 ;

王海滨 ;

李志信 ;

过增元 .

中国生物工程杂志, 2005, (03) :69-73

[4]

Bachmann,B,Lüke,W,Hunsmann,G.Improvement of PCR-amplified DNA sequencing with the aid of detergents. Nucleic Acids Research . 1990

[5]

Ignatov K.B,et al.A New Approach to Enhanced PCRSpecificity.. Russian Journal of Bioorganic Chemistry . 2003

[6]

Nanotechnology[P]. COLLI ALAN[GB];WHITE RICHARD[GB].中国专利:US2012038409A1,2012-02-16

[7]

Kwok S,Kellogg D E,McKinney N,et al.Effects of primer-template mismatches on the polymerase chain reaction: Human immunodeficiency virus type 1 model studies. Nucleic Acids Research . 1990

[8]

WINSHIP P R.An improved method for directly sequencing PCR amplified material using dimethylsulfoxide. Nucleic Acids Research . 1989

[9] 纳米银颗粒增强聚合酶链式反应长片段DNA反复扩增的特异性 [J].

王群 ;

李静 ;

曹小红 ;

张治洲 .

天津科技大学学报, 2007, (02) :1-5

[10]

Li H,Rothberg L.Colorimetric detection of DNAsequences based onelectrostatic interactions with unmodified gold nanoparticles. ProcNatl Acad Sci US A . 2004

← 1 2 →