甘蓝CMS系的原生质体培养与植株再生

对雄性不育结球甘蓝“CMS 黑叶大平头BC5”的叶及下胚轴原生质体的分离、培养与植株再生等的研究表明,以2%纤维素酶（OnozukaR-10）+0.5%离析酶（R-10）的酶液游离CMS 的试管苗叶、下胚轴及原生质体产量高,去壁效果好。适合于CMS 叶原生质体及下胚轴原生质体纯化的漂浮液蔗糖浓度分别为16%和17%。原生质体的清洗和收集均以500r/min 的离心效果为佳。在修改后的MS 培养基（MS1+NAA0.2mg/l+BA2mg/l）上获得了较快的细胞壁再生和分裂启动、最高的分裂频率和植板率。叶原生质体第一次分裂在培养3～4天后,下胚轴原生质体在48小时左右发生分裂。培养20～30天即形成肉眼可见的微愈伤颗粒,40天左右即可达1mm 大小。MB2培养基（MB+甘氨酸2mg/l+NAA0.2mg/l+BA2mg/l）对微愈伤组织增殖的效果最佳.在MS2（MS+NAA0.2mg/l+BA3mg/l）和MS4（MS+NAA0.4mg/l+BA3mg/l）培养基上,芽分化效果最好。在不加任何激素的MS 培养基上诱导生根,2周后即可获得完整的再生植株。